Estabilidad del producto hemoclasificador Hemo-CIM® Anti-B: Evaluación durante 2 años / Stability of the Anti-B Hemo-CIM® hemoclassifier product: A 2-year evaluation

Los estudios de estabilidad de los reactivos frabricados a partir de anticuerpos monoclonales de origen murino, permiten establecer adecuadamente la vida de estos productos, y su realización constituye un requisito indispensable en el cumplimiento de las buenas prácticas de producción. Se usaron los métodos de hemaglutinación para medir la actividad biológica del producto Hemo-CIM® Anti-B expresada en la potencia, la avidez y la intensidad, frente a un panel de eritrocitos del grupo B y A1B, para demostrar más efectivamente cualquier deterioro del reactivo. Se estableció que la vida útil del hemoclasificador producido en el Centro de Inmunología Molecular es de 2 años con una temperatura de almacenamiento entre 2 y 8 oC. La evaluación que simula las condiciones a la que los usuarios someten a estos reactivos, demostró que el reactivo mantiene las características de calidad que se requieren para su uso. La estabilidad lograda con el Hemo-CIM® Anti-B es similar a la informada con el producto hemoclasificador monoclonal murino Hemo-CIM® Anti-A.

The stability studies of the reagents made from monoclonal antibodies of murine origin allow to establish the life of these products adequately and are an indispensable requisite for the fulfillment of the good practices of production. The hemagglutination methods were used to measure the biological activity of the Anti-B Hemo-CIMâ product expressed in the potency, avidity and intensity against a panel of erythrocytes of the group B and A1B in order to show in a more effective way any deterioration of the reagent. It was established that the useful life of the hemoclassifier produced at the Center of Mollecular Biology is of 2 years at a storage temperature between 2 and 8ºC. The evaluation that simulates the conditions to which the users subject these reagents showed that the reagent maintains the quality characteristics required for its use. The stability attained with the Anti-B Hemo-CIMâ is similiar to that reported with the murine monoclonal Anti-A Hemo-CIMâ hemoclassifier product.

Reactivo hemoclasificador monoclonal cubano Hemo-Cim anti-A. Estudio de estabilidad / Cuba anti-A Hemo-Cim hemoclassifier monoclonal reagent. Stability study

Los estudios de estabilidad de los reactivos fabricados a partir de anticuerpos monoclonales (AcM) de origen murino, son esenciales para obtener resultados adecuados en su aplicación práctica y constituyen un requisito indispensable en las buenas prácticas de producción, lo que permite establecer adecuadamente la vida de estos productos. Se usaron los métodos de hemaglutinación recomendados para medir la actividad biológica del producto Hemo-CIM anti-A expresada en la potencia, la avidez y la intensidad frente a un panel de eritrocitos del grupo A1 y A2B, que se incluyó por su baja expresión del antígeno A para demostrar más efectivamente cualquier deterioro que sufriera el reactivo. Se estableció que la vida útil del reactivo hemoclasificador producido en el Centro de Inmunología Molecular es de 2 años y se determinó que la temperatura de almacenamiento del producto está entre 2 y 8 ºC. Además, los lotes que se colocaron diariamente en la meseta de trabajo durante 5 horas a 21 ºC a partir del mes 0 y a los 8, 14 y 22 meses después de su producción, simulando las condiciones a la que los usuarios someten a estos reactivos, mantuvieron las características de calidad que se requieren para su uso, lo que demostró que con este producto se puede trabajar en esas condiciones

Ensayo de terreno de los rectivos hemoclasificadores monoclonales HEMO-CIM anti-A y HEMO-CIM anti-B como productos terminados / Field assay of HEMO-CIM anti-A and HEMO-CIM anti-B monoclonal hemoclassifying reactives as finished products

En Cuba, el registro sanitario de los diagnosticadores está regulado por normas estatales y en el caso de los reactivos hemoclasificadores se exige el ensayo de terreno en comparación con productos similares de calidad reconocida. Se evaluaron los productos terminados Hemo-CIM anti-A y anti-B elaborados en el Centro de Inmunología Molecular/CIMAB S.A., La Habana, en paralelo con los sueros policlonales humanos (MediCuba, La Habana) y con reactivos monoclonales equivalentes (Biotest AG, RFA), mediante un estudio multicéntrico en un servicio de transfusiones, 2 bancos de sangre provinciales y 2 municipales, con 1 130 muestras de sangre, de ellas 202 seleccionadas según criterios específicos de inclusión, por los métodos de hemaglutinación en láminas portaobjeto y centrifugación en tubos. Se encontró una especificidad diagnóstica del 100 porciento y una sensibilidad siempre superior al 99,5 porciento para ambos reactivos. Las opiniones de los posibles clientes sobre calidad, presentación y utilidad de los productos fueron satisfactorias

Fenotipos débiles del antígeno A (sistema ABO de grupos sanguíneos) en donantes de sangre / Weak phenotypes of the A antigen (ABO-group system) in blood donors

El grupo sanguíneo A se subdivide en los subgrupos A1 y A2, sobre la base del número de sitios antigénicos A sobre la superficie del hematíe. Además se han descrito otros fenotipos débiles de este antígeno. Para la determinación de éstos se utilizó la técnica de hemaglutinación con antisueros policlonales y en los casos de aglutinación débil, tardía o de discrepancias con el grupo reverso, se realizó ésta con antisueros anti-A1 y anti-H. Se estudiaron 6 346 donantes de sangre del Banco Municipal "10 de Octubre" durante 5 meses del año 1996: 48,79 porciento fueron del grupo O, 35,15 porciento del A, 12,20 porciento del B y 3,58 porciento del AB. Catorce donantes (0,22 porciento) resultaron A2B, 2 (0,03 porciento) A2BHw, 1 Ael (0,01 porciento) y 1 Aint (0,01 porciento). Las células con estos subgrupos se utilizaron en la confección de un panel para evaluar un anticuerpo monoclonal anti-A producido en el Instituto de Hematología e Inmunología

Incidencia de fenotipos D débiles y D parciales en donantes de sangre de Guanabacoa / Incidence of weak and partial D phenotypes in blood donors from Guanabacoa

Se determinó la incidencia de fenotipos D débiles y D parciales en 4 339 donantes del Banco de Sangre de Guanabacoa. La muestra consistió en 2 508 individuos blancos y 1 831 no blancos. La tipificación Rh (D) de la sangre se realizó con un anti-D policlonal (MediCuba) y a las células Rho negativas se les determinó el fenotipo D en la prueba de antiglobulina indirecta. Los hematíes D se clasificaron en D débiles y D parciales con el empleo de un papel de anticuerpos monoclonales (BPL) mediante las técnicas de aglutinación en salina y en papaína. La frecuencia de fenotipos D débiles en blancos fue del 0,11 porciento y no se encontraron variantes D en este grupo. En los no blancos la frecuencia de D fue del 0,43 pociento y la de D parciales fue del 0,16 porciento; 2 individuos pertenecían a la categoría DIVb y otro a la Div. La incidencia de fenotipos D débiles fue mayor en donantes no blancos y en este grupo se encontraron las variantes D, en específicos Div, con una frecuencia más elevada que la encontrada en otros países para la categoría Dvi que es la más común en poblaciones caucásicas con una frecuencia de 0,02-0,05 porciento

Incidencia de la deficiencia de sustancia H en los eritrocitos de los grupos A y AB / Incidence of H deficiency in erythrocytes of A and AB groups

Se investigó la deficiencia de sustancia precursora H de los grupos sanguíneos A y AB, en 547 donantes de sangre (397 blancos y 150 negros). Se estimó el rango de puntuación de la aglutinación de un grupo control de 40 donantes, correspondientes a los grupos sanguíneos A1, A2, A1B y A2B. En el suero de los donantes deficientes de H se determinó la presencia de anticuerpos eritrocitarios. En los donantes blancos el grupo A, predominó sobre el A2, de forma contraria ocurrió en los negros. En los 2 grupos raciales estudiados, tanto para el grupo A como el AB, se encontraron variantes deficientes de H codificadas por los genes A1 y A2. En toda la muestra se halló una mayor frecuencia de variantes deficientes A2B, especialmente en los negros. No se observaron anticuerpos anti-H en el suero de las variantes

Interleucina-2 en pacientes con Síndromes Linfoproliferativos / Interleukin-2 in patients with lymphoproliferative syndromes

Se estudió la producción de interleucina-2 (IL-2) en las células mononucleares periféricas de controles normales y de pacientes con sídromes linfoproliferativos. Los valores normales de esta linfocina fueron: 31,74 ñ 18,25 µ/mL. Se encontró elevada en 3 pacientes con leucemia linfoide crónica de células B en estadio clínico III; disminuida en un paciente con linfoma no hodgkiniano y en otro con leucemia de células peludas; y ligeramente baja en pacientes con leucemia linfoide crónica en estadios clínicos O-II. No se encontró correlación entre los valores de IL-2 y la hemoglobina, el conteo global de leucocitos y la administración o no de tratamiento, pero se halló una correlación positiva con el conteo de linfocitos

Introduccion de un ultramicrometodo inmunocitoquimico para la cuantificacion de subpoblaciones linfocitarias identificadas con anticuerpos monoclonales

Se introdujo en nuestro laboratorio un ulktramicrometodo inmunocitoquimico (UMICIQ) para la cuantificacion de las principales subpoblaciones de linfocitos T identificadas con los anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4 y anti-CD8. Las deteminaciones se realizaron en celulas mononucleares de sangre periferica de donantes de sangre supuestamente sanos, con edades entre 21 y 47 anos. El estudio de los 15 primeros individuos se realizo tanto por el UMICIQ como por un micrometodo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), y cuando se compararon los resultados, no se encontraron diferencias estadisiticamente significativas. Para establecer los valores de referencia para el UMICIQ se tomaron las muestras de 30 donantes. Con la aplicacion de este metodo se pueden evaluar las subpoblaciones linfocitarias con una sensibilidad y especificidad similares a las observadas con la microtecnica del IFI; sin embargo, se introducen una serie de ventajas como: uso de menores concentraciones de celulas y por ende menor volumen de sangre para cada determinacion, uso de diluciones mayores de los anticuerpos y conjugados, se hace innecesario el uso del microscopio de luz UV y de la centrifuga refrigerada, se pueden distinguir la morfologia y el linaje de las celulas simultaneamente con la reactividad inmunologica de sus antigenos

Obtención de factores de crecimiento a partir de medios condicionales: aplicación en cultivos celulares / Otention of growth factors from conditional medium': apllication in cell cultures

Entre las diferentes actividades biológicas de la interleucina-6 se encuentra la inducción de la proliferación de cultivos de hibridomas/plasmacitomas y la estimulación de los progenitores hematopoyéticos pluripotenciales, que alcanza su desarrollo y diferenciación en presencia de otros factores de crecimiento hematopoyéticos. La interleucina-6 y los factores estimuladores de colonias(fracciones dializadas) se obtuvieron a partir de medios condicionados de fibroblastos y de placenta humana, respectivamente. Mediante la proliferación de la líneacelular de mieloma de ratón P-3X63-AG853 se comprobó la acción estimuladora de los medios condicionados de fibroblastos, en especial cuando éstos se trataron con concanavalina A y se obsrvaron agrupaciones celulares(clusters) y colonias en los cultivos de médula ósea humana suplementados con las fracciones de medios condicionados de placenta

Factor de transferencia y levamisol: evaluación clínica e inmunológica en niños con infecciones respiratorias recurrentes; informe preliminar / Transference factor and levamisole: clinical and inmunological evaluation in children with recurrent respiratory infections: preliminary report

Se realizó la evaluación del tratamiento inmunoestimulante conjuntamente con el factor de transferencia (FT) y el levamisol, en 20 niños entre 1 y 5 años de edad con infecciones repiratorias recurrentes (IRR), por medio de su evolución clínica e inmunológica en un período de 24 semanas. Se demostró una alteración en el sistema inmune ocasionada por una disminución de los linfocitos T totales y T auxiliadores (CD4) así como de la actividad citotóxica de las células asesinas naturales (NK) y de la citotoxicidad celular dependientes de anticuerpos (ADCC). La evolución clínica y de laboratorio resultó favorable en todos los casos estudiados

Purificaciòn de un anticuerpo monoclonal anti-HLA-A a partir del sobrenadante de un cultivo de hibridomas de ratón / Purification of an anti-HLA-A monoclonal antibody from a supernatant of culture of mouse hybridomas

Se procedió a la detección y posterior purificación mediante precipitación salina y cromatografía de intercambio iónico en DE-52, de un anticuerpo monoclonal de la clase IgG del sobrenadante de un cultivo de la línea de hibridoma de ratón HLA-2cs productor de anticuerpos específicos contra el el locus A del complejo principal de histocompatibilidad. Se demostró la pureza del producto final mediante inmunoelectroforesis con el empleo de anticuerpos específicos contra inmunoglobulina de ratón. La concentración obtenida fue de 769 230 *g, IgG/mL para el 60 % de rendimiento

Cultivo de células hematopoyéticas en medio libre de suero: una alternativa ventajosa / Culture of hematopoietic cells in serum free medium: an advantageous alternatives

Se describen los elementos nutricionales más importantes presentes en los medios de cultivos celulares que se utilizan actualmente para el mantenimiento de células sanguíneas y de médula ósea, así como de líneas de células transformadas in vitro. Se analizan las ventajas y desventajas del suero como suplemento de los medios y la caracterización de sus factores y se detallan los métodos empleados para sustituirlo en los medios de cultivo. Se revisan los elementos esenciales que han permitido cultivar linfocitos y células hematopoyéticas en medios libres de suero, tales como la transferrina, la albúmina, los lípidos, la insulina y algunos compuestos sulfíhidrilos. Se señalan los nuevos medios libres de sueron, sus ventajas para el cultivo de células hematopoyéticas y se describen los suplementos empleados y las líneas celulares que crecen en los medios de cultivo de este tipo